四虎国产精品永久在线下载丨少妇人妻88久久中文字幕丨欧美v日韩v亚洲v最新在线丨丰满人妻少妇一区丨乱码久久久久久夜深人妻

您好,歡迎光臨達科為生物城!
免費熱線電話 : 400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) 收藏達科為生物城
當前位置: 首頁 > 技術天地 > 技術專欄 > 流式技術 > 正文

Na?ve T cell 細胞極化之Treg

作者:admin 信息來源:達科為 日期:20140610 打印 字體:  
分享到:

Na?ve T cell 細胞極化之Treg


Treg 細胞:Treg 細胞(也稱作調節性T細胞或者是T調控細胞)是具有顯著免疫抑制性功能的細胞。它能夠抑制其他細胞的免疫應答,在維持機體免疫平衡和預防自身免疫疾病、移植排斥方面發揮著重要作用。Treg 細胞特異性地表達 CD4CD25Foxp3+, CD127 不表達或者弱表達。IL-2 和 TGF-β 是誘導 Treg 主要的細胞因子。 

 Na?ve T cell 細胞極化之Treg


小鼠脾臟CD4+ T細胞Treg極化實驗


1.根據實驗方法從小鼠脾臟中分離 naive  CD4 CD25 T 細胞。


2. anti-mouse  CD3ε 包被實驗:在細胞培養板上,加入 anti-mouse  CD3ε,  clone  145-2C11  (10 μg/ml),37℃ 孵育2小時或者4℃過夜。然后將液體輕輕地倒出,用無菌 PBS 進行清洗3次,棄上清。


3.將分離出的 naive  CD4 CD25?  T 細胞以 5 x105/ml 的濃度種于包被好的培養板中同時加入 anti-mouse  CD28, clone  37.51  (10 μg/ml), TGF-β1  (5 ng/mL), IL-2 (10 ng/ml)進行培養。


4.細胞培養3天后,收集細胞進行清洗。然后進行細胞染色實驗。


實驗相關材料


RBC  Lysis  Buffer  (cat.  # 420301); Anti-mouse  CD3(LEAF?  format,  cat. # 100314), Anti-mouse  CD28  (LEAF?  format,  cat. # 102112), Recombinant  Mouse  IL-2  (carrier-free)  (cat #575402), Recombinant  human  TGF-β1  (carrier-free)  (cat.  # 580702),  Brefeldin  A  (cat.  # 420601), PdBu  (Phorbol  12,13-dibutyrate)  (cat.  # P1269  from  Sigma)


參考文獻:


1.Rahul Roychoudhuriet al. 2013.Nature 498:506-510.  


2. Nicholas Arpaiaet al. 2013.Nature 504:451-455.


3. Steven Z. Josefowicz,et al.2012.Nature 482:395-399.

  

4.Emily B Heikamp,et al.2014 Nature Immunology 15:457-464.

微博名稱:達科為生物城
微博地址:
http://e.weibo.com/bjdakewe

微信二維碼:
北京達科為生物技術有限公司  京ICP備13014125號-1
全國免費熱線:400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) Email:bj_info@dakewe.net
聯系我們
© 2013 版權所有 北京達科為生物技術有限公司
主站蜘蛛池模板: 长顺县| 宜城市| 双城市| 手机| 丰原市| 荣昌县| 临邑县| 德格县| 卢氏县| 堆龙德庆县| 津市市| 山西省| 玉门市| 五台县| 泸州市| 中方县| 崇义县| 昌江| 和平县| 雷州市| 博野县| 西华县| 吉木萨尔县| 高要市| 醴陵市| 亚东县| 博罗县| 增城市| 吕梁市| 宣化县| 林西县| 三江| 聂荣县| 富平县| 霸州市| 新竹市| 乌兰察布市| 民县| 开封县| 璧山县| 涟源市|